近年来，随着我国养猪业规模化、集约化快速发展，疫病感染压力也加大，表现为多种病原体的混合感染和继发感染，持续感染和潜伏感染也时有发生，临床表现轻、非典型病变对猪病综合防控提出了挑战。传统的诊疗手段已不能满足现代养殖的防控要求，采取以疫苗为主的预防措施逐渐成为规模化猪场防控的主要措施。抗体检测是评价疫苗免疫效果的主要方法。只有免疫猪的抗体水平达到一定的效价，才能预防相应病原体的感染。同时，对未接种疫苗的猪进行抗体检测，有助于了解猪体内的野生病毒感染情况，为制定猪场疫病综合防控方案提供重要参考。因此，抗体检测将逐渐成为现代养殖中病害监测的常态化工作。鉴于此，本文就猪抗体检测的原理、主要方法、作用和意义、检测结果分析等进行论述，总结和探讨抗体检测在猪身上的应用。在疾病预防控制中的应用仅供兽医工作者参考。
一、抗体检测原理
当动物机体受到抗原刺激时，体内免疫细胞识别病原体，产生一系列复杂的免疫链反应，产生相应的特异性抗体。抗体可以特异性地直接中和抗原，也可以中和病原体的毒性作用或阻断病原体对靶细胞的侵袭。抗体检测的原理是基于抗原抗体的特异性结合反应。通过检测动物体内的抗体水平，我们可以了解抗原的免疫力或感染程度。
二、抗体检测的主要方法
随着现代免疫学技术的飞速发展，各种基于抗原抗体反应的抗体检测方法不断发展和成熟。目前常用的猪病抗体检测技术主要有中和试验、凝集试验、琼脂扩散试验、免疫荧光试验、ELISA、胶体金试纸条等方法。其中，中和试验法准确，但需要昂贵的仪器设备、复杂的操作，以及经验丰富的专业技术人员对结果进行判断。猪病常用的凝集试验方法主要有颗粒抗原与抗体反应的直接凝集试验、以乳胶颗粒为载体的乳胶凝集试验和涉及红细胞的血凝抑制试验。凝集试验法操作简单，检测速度快，但特异性低；琼脂扩散试验不需要设备，操作简单，但特异性较低，不适合大批量样品的检测；结果判读，无需仪器，操作简单，特别适用于基层兽医部门和养殖场（户），但其灵敏度低，检测结果只能提供阳性、弱阳性、半定量结果。阴性，不能提供数值检测结果； ELISA法具有灵敏、特异、简便、快速、稳定、高通量、易操作等优点，用于猪病免疫猪体内抗体水平的监测、猪病的快速诊断和流行病学调查。已得到广泛应用，已显示出良好的应用前景。各种猪常见病抗体检测方法各有优缺点，但对于大规模流行病学调查和大样本抗体监测，目前的ELISA方法具有其他方法无法比拟的优势。
三、抗体检测的意义
3.1 疾病诊断
血清抗体检测难以区分母源抗体、疫苗免疫产生的抗体和野病毒感染产生的抗体，但可结合猪龄、疫苗接种史、病原体流行病学、病猪临床症状及综合病理变化等临床病症的诊断，以及一些常见的猪病，可利用病毒缺失基因或病毒非结构蛋白产生的抗体来区分野生病毒感染抗体和疫苗免疫抗体。例如，目前我国广泛使用的猪伪狂犬病病毒gE基因缺陷型弱毒疫苗，不产生针对gE蛋白的抗体。建立了包被抗原间接ELISA检测猪伪狂犬病毒野生型抗体的方法，通过检测gE抗体可实现对野生型猪伪狂犬病毒感染的鉴别诊断。目前，猪细小病毒灭活疫苗在我国应用广泛。因为灭活疫苗免疫猪后只刺激机体产生结构蛋白抗体，不刺激机体产生非结构蛋白抗体，而野生病毒感染的猪可分别产生大量非结构蛋白抗体。 NS1非结构蛋白抗体和VP2结构蛋白抗体的检测可以区分猪细小病毒灭活疫苗免疫猪和猪细小病毒野生病毒感染猪。刘健等。分别以猪细小病毒NS1和VP2蛋白为包被抗原，建立了检测猪细小病毒野生病毒抗体和疫苗免疫抗体的间接ELISA方法。两种方法可以联合起来应对猪细小病毒（PPV）野生病毒感染的快速诊断、猪免疫后抗体水平的检测，以及猪体内猪细小病毒病的逐步净化。
3.2流行病学调查
血清学流行病学调查方法可以快速掌握猪在一定地区、一定时间的病原体感染情况和流行情况，为制定合理的防控措施提供参考。李娇等。山东、河南、江苏、广东2013年送检血清样本采用ELISA法检测猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病4种猪常见病。抗体检测表明：四种猪病的自然感染率分别为4.54%、8.20%、11.24%和41.44%。四种猪病的自然传染较为普遍。控制工作。为了解云南楚雄地区散户猪伪狂犬病病毒（PRV）野生病毒感染情况，吴成华等采用间接ELISA法检测了楚雄地区9个散户随机采集的154份血清样本中的野生病毒抗体。野生病毒抗体阳性率为25.32%，说明楚雄地区散户PRV野生病毒感染率较高，为楚雄地区猪伪狂犬病的防控和净化提供了理论依据。
3.3 评价疫苗质量，评价疫苗免疫效果
疫苗的质量直接决定了疫苗免疫的整体效果。各家疫苗生产企业的生产工艺、毒株、疫苗安全性、稳定性和可控性不同，疫苗质量差异较大。疫苗在储存、运输、使用过程中可能会受到外界环境的影响，尤其是高温、日晒等，导致疫苗质量严重下降。生猪受猪圆环病毒病等免疫抑制性疾病的影响，以及饲喂霉变饲料等日常饲养管理不善，可引起
成疫苗免疫效果下降，疫苗免疫失败。通过免疫猪群的抗体检测，可以了解疫苗免疫注射后猪群是否产生了抗体，以及抗体水平的高低是否可以抵抗病原的感染，故依据抗体水平检测的结果在很大程度上可对疫苗质量进行评价，对疫苗免疫效果进行评估。殷方芝等为评价猪瘟脾淋苗和细胞苗的免疫效果，随机选取了45 头和20 头断奶仔猪，分别用猪瘟脾淋苗和细胞苗免疫猪群，定期进行免疫抗体检测，结果显示脾淋苗二免后抗体阳性率总体维持在30% ～ 40% 左右，细胞苗二免后抗体阳性率达到87%，且离散度较低，群体免疫抗体水平比较均匀。与猪瘟脾淋苗相比，细胞苗免疫效果更加理想。3.4 制定和修改免疫程序
猪只每年都要进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫、猪细小病毒病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪流行性腹泻、猪支原体、副猪嗜血杆菌病等多种疾病的疫苗免疫，每种疾病对猪的易感日龄各不相同，且多种疫苗同时免疫还会产生相互干扰作用，降低疫苗免疫效果。故养殖场（户）对猪不同时间进行何种疫苗免疫需制定一个合理的免疫程序。而免疫程序的制定除受到各种疫苗相互干扰外，还与母源抗体水平、疫苗种类与免疫次数、免疫接种时间与方法、当地不同季节猪病流行情况等因素密切相关。疫苗良好免疫效果的获得依赖于初免和二免时机是否合适，母源抗体水平决定首次免疫的时间，残留抗体水平决定二次免疫的时间。当猪体内母源抗体或残留抗体水平过高时，过早注射疫苗会使抗体中和注射的疫苗，导致疫苗免疫失败；而当猪体内母源抗体或残留抗体水平过低时，若注射疫苗较晚，猪体内无抗体存在，将造成免疫空白期，导致病原感染。通过抗体检测可以及时监测猪体内抗体的消长状况，选择恰当的免疫时机，制定科学合理的免疫程序。且免疫程序不是一成不变的，不能机械地效仿别的猪场或本猪场以往的免疫程序，要对猪群进行定期跟踪抗体检测，以检测的实际抗体水平为依据，随时调整与修订免疫程序，制订出适合本场的免疫程序，使疫苗免疫接种效果达到最佳水平。呼显生等为了筛选出适合生产实际和防疫要求的免疫程序，选择猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体阴性、猪伪狂犬病抗体阴性、猪瘟抗原阴性的20头仔猪，随机分成4 组，分别设计4 个免疫程序进行试验。试验结果表明：只有试验I 组的免疫程序可行，即21 日龄进行猪瘟疫苗首免，60 日龄加强免疫1 次；母猪分娩前第10天进行猪伪狂犬病疫苗首免，35 日龄加强免疫1 次；35 日龄进行猪繁殖与呼吸综合征疫苗首免，60 日龄加强免疫1 次。
4、抗体检测的结果分析
对猪不同时期进行抗体检测，可能会出现多种不同的检测结果，以下我们对常见几种可能出现的抗体检测结果进行分析。
4.1 没有接种疫苗却检测出抗体
猪群近期接触并感染了病原但尚未发病，应及时对猪群进行疫苗紧急免疫接种。当然此种情况对于仔猪来讲，有可能检测到的是母源抗体，也有可能野毒感染抗体，1 个星期后可再次采集血清，进行抗体检测，如抗体滴度下降则为母源抗体；如抗体滴度未下降甚至持续升高则表明为野毒感染。
4.2 疫苗免疫后抗体水平高，整齐度高
表明接种疫苗的时机最佳，疫苗免疫效果确实，猪体健康状况良好，抗病能力较强，发生野毒感染的概率较小，无需修订免疫程序，但仍需定期进行抗体检测，确保猪群具有较高抗体水平和整齐度。
4.3 疫苗免疫后抗体水平低，整齐度低
表明疫苗免疫接种的效果不理想，已造成免疫失败。原因可能为，确定的免疫时间不对，免疫程序不合理，疫苗保存、运输不当造成疫苗失效，接种人员的操作不规范，疫苗免疫的剂量不足。应及时进行补充免疫，若补免后抗体水平依旧无法提高，表明该猪群或存在免疫抑制性疾病，或存在饲养管理漏洞，预示将要发生疫病，应排查一切可能原因，果断采取有效的预防控制手段。
4.4 疫苗免疫后抗体水平高，整齐度低
抗体水平高表明疫苗免疫接种的时间是比较合理的，但整齐度低与疫苗质量、猪只个体差异、应激、免疫剂量、注射方法与注射部位等均密切相关。此时，应重点排查是否存在免疫抑制性疾病病原体的感染、饲料中的霉菌毒素等多种免疫抑制性因素，是否使用同一批次疫苗，疫苗使用中是否存在长时间的高温、日晒，免疫剂量是否确实，是否存在少注、漏注，注射方法与注射部位是否准确，免疫注射和保定操作对猪只是否造成应激等，务必根据具体情况找出免疫效果不理想的具体原因，及时加强饲养管理及修订免疫操作方法。
4.5 疫苗免疫后抗体水平低，整齐度高
表明免疫程序不合理，就其原因可能为：免疫时间选择得不对，或受到了母源抗体的干扰，或猪群中存在免疫抑制性因素，或免疫过于频繁，2 种疫苗免疫间隔过短，先接种疫苗诱导产生干扰素抑制了后接种疫苗的增殖，疫苗之间产生了相互干扰。应根据抗体检测结果，确定合适的免疫时机进行补免。
5、结语
综上所述，抗体检测是猪病临床诊断的重要手段之一，也是免疫猪群免疫水平监测的重点之一，对猪病流行状态的监测、疫苗免疫效果的评价及免疫程序的修订等均具有重要的指导意义。随着我国养猪产业新技术和新模式的不断应用，依靠经验主义的免疫程序和免疫方法已不能满足现代化规模养殖的需求，定期开展抗体检测工作，制定科学合理的免疫程序，已成为猪病综合防控中不可缺少的一项重要措施。相信随着人们对抗体检测工作的日益重视，以及各种猪病抗体检测方法的不断发展，抗体检测在猪病的综合防控中将是不可或缺的重要一环，从而保障我国养猪业快速、健康发展。
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